1. Scopo: Questa procedura mira a fornire una procedura standardizzata per le operazioni asettiche e la protezione delle stanze sterili.
2. Ambito di applicazione: laboratorio di test biologici
3. Persona responsabile: Supervisore QC Tester
4.Definizione: Nessuna
5. Precauzioni di sicurezza
Eseguire rigorosamente le operazioni asettiche per prevenire la contaminazione microbica;gli operatori devono spegnere la lampada UV prima di entrare nella stanza sterile.
6.Procedure
6.1.La stanza sterile deve essere dotata di una sala operatoria sterile e di una stanza tampone.La pulizia della sala operatoria sterile dovrebbe raggiungere la classe 10000. La temperatura interna dovrebbe essere mantenuta a 20-24°C e l'umidità dovrebbe essere mantenuta al 45-60%.La pulizia della panca pulita dovrebbe raggiungere la classe 100.
6.2.La stanza sterile deve essere mantenuta pulita ed è severamente vietato accumulare detriti per prevenire la contaminazione.
6.3.Evitare rigorosamente la contaminazione di tutte le apparecchiature di sterilizzazione e dei terreni di coltura.Quelli che sono contaminati dovrebbero smettere di usarli.
6.4.La stanza sterile deve essere dotata di disinfettanti a concentrazione operativa, come soluzione di cresolo al 5%, alcol al 70%, soluzione di clormetionina allo 0,1%, ecc.
6.5.La stanza sterile deve essere regolarmente sterilizzata e pulita con un disinfettante appropriato per garantire che la pulizia della stanza sterile soddisfi i requisiti.
6.6.Tutti gli strumenti, gli strumenti, i piatti e gli altri oggetti che devono essere portati nella stanza sterile devono essere avvolti strettamente e sterilizzati con metodi appropriati.
6.7.Prima di entrare nella stanza sterile, il personale deve lavarsi le mani con sapone o disinfettante, quindi indossare abiti da lavoro speciali, scarpe, cappelli, maschere e guanti nella stanza tampone (o asciugarsi nuovamente le mani con etanolo al 70%) prima di entrare nella stanza sterile.Eseguire operazioni in camera batterica.
6.8.Prima di utilizzare la stanza sterile, la lampada a raggi ultravioletti nella stanza sterile deve essere accesa per l'irradiazione e la sterilizzazione per più di 30 minuti e contemporaneamente il banco pulito deve essere acceso per il soffiaggio dell'aria.Una volta completata l'operazione, la stanza sterile deve essere pulita in tempo e quindi sterilizzata mediante luce ultravioletta per 20 minuti.
6.9.Prima dell'ispezione, l'imballaggio esterno del campione di prova deve essere mantenuto intatto e non deve essere aperto per evitare la contaminazione.Prima dell'ispezione, utilizzare batuffoli di cotone con alcool al 70% per disinfettare la superficie esterna.
6.10.Durante ogni operazione, dovrebbe essere effettuato un controllo negativo per verificare l'affidabilità del funzionamento asettico.
6.11.Quando si assorbe il liquido batterico, è necessario utilizzare una sfera di aspirazione per assorbirlo.Non toccare la cannuccia direttamente con la bocca.
6.12.L'ago per l'inoculazione deve essere sterilizzato alla fiamma prima e dopo ogni utilizzo.Dopo il raffreddamento, la coltura può essere inoculata.
6.13.Le cannucce, le provette, le piastre di Petri e gli altri utensili contenenti liquido batterico devono essere immersi in un secchio di sterilizzazione contenente una soluzione di lisolo al 5% per la disinfezione, quindi estratti e risciacquati dopo 24 ore.
6.14.Se è stato versato del liquido batterico sul tavolo o sul pavimento, versare immediatamente una soluzione di acido carbolico al 5% o Lysol al 3% sull'area contaminata per almeno 30 minuti prima di trattarla.Quando gli indumenti da lavoro e i cappelli sono contaminati da fluido batterico, devono essere tolti immediatamente e lavati dopo la sterilizzazione a vapore ad alta pressione.
6.15.Tutti gli oggetti contenenti batteri vivi devono essere disinfettati prima di essere sciacquati sotto il rubinetto.È severamente vietato inquinare le fognature.
6.16.Il numero di colonie nella stanza sterile deve essere controllato mensilmente.Con il banco pulito aperto, prendere un numero di piastre Petri sterili con un diametro interno di 90 mm e iniettare asetticamente circa 15 ml di terreno di coltura agar nutriente che è stato sciolto e raffreddato a circa 45°C.Dopo la solidificazione, posizionarlo sottosopra a 30-35 Incubare per 48 ore in un incubatore a ℃.Dopo aver verificato la sterilità, prendere da 3 a 5 piastre e posizionarle a sinistra, al centro e a destra della posizione di lavoro.Dopo aver aperto il coperchio ed averli esposti per 30 minuti, metterli capovolti in un incubatore a 30-35°C per 48 ore ed estrarli.esaminare.Il numero medio di batteri vari sulla piastra in un'area pulita di classe 100 non deve superare 1 colonia e il numero medio in una camera bianca di classe 10000 non deve superare 3 colonie.Se il limite viene superato, la stanza sterile deve essere disinfettata accuratamente finché le ispezioni ripetute non soddisfano i requisiti.
7. Fare riferimento al capitolo (Metodo di ispezione della sterilità) in "Metodi di ispezione igienica dei farmaci" e "Pratiche operative standard cinesi per l'ispezione dei farmaci".
8. Dipartimento Distribuzione: Dipartimento Gestione Qualità
Guida tecnica per camere bianche:
Dopo aver ottenuto un ambiente sterile e materiali sterili, dobbiamo mantenere uno stato sterile per studiare uno specifico microrganismo conosciuto o utilizzare le sue funzioni.Altrimenti possono facilmente mescolarsi diversi microrganismi provenienti dall'esterno. In microbiologia il fenomeno della mescolanza di microrganismi non rilevanti provenienti dall'esterno viene chiamato batteri contaminanti.Prevenire la contaminazione è una tecnica fondamentale nel lavoro microbiologico.La sterilizzazione completa da un lato e la prevenzione della contaminazione dall'altro sono due aspetti della tecnica asettica.Inoltre, dobbiamo evitare che i microrganismi studiati, in particolare i microrganismi patogeni o i microrganismi geneticamente modificati che non esistono in natura, fuoriescano dai nostri contenitori sperimentali nell'ambiente esterno.A questi scopi, in microbiologia, esistono numerose misure.
La stanza sterile è solitamente una piccola stanza appositamente allestita nel laboratorio di microbiologia.Può essere costruito con lastre e vetro.L'area non dovrebbe essere troppo grande, circa 4-5 metri quadrati, e l'altezza dovrebbe essere di circa 2,5 metri.Una stanza tampone dovrebbe essere allestita all'esterno della stanza sterile.La porta della stanza tampone e la porta della stanza sterile non devono essere rivolte nella stessa direzione per evitare che il flusso d'aria introduca batteri vari.Sia la stanza sterile che la stanza buffer devono essere ermetiche.Le apparecchiature di ventilazione interna devono essere dotate di dispositivi di filtraggio dell'aria.Il pavimento e le pareti della camera sterile devono essere lisci, difficili da trattenere lo sporco e facili da pulire.La superficie di lavoro dovrebbe essere piana.Sia la stanza sterile che la stanza buffer sono dotate di luci ultraviolette.Le luci ultraviolette nella stanza sterile sono a 1 metro di distanza dalla superficie di lavoro.Il personale che entra nella stanza sterile deve indossare indumenti e cappelli sterilizzati.
Attualmente, le stanze sterili esistono principalmente negli stabilimenti di microbiologia, mentre i laboratori generali utilizzano banchi puliti.La funzione principale della panca pulita è quella di utilizzare un dispositivo a flusso d'aria laminare per rimuovere varie polveri minuscole, compresi i microrganismi, sulla superficie di lavoro.Il dispositivo elettrico consente all'aria di passare attraverso il filtro hepa e quindi di entrare nel piano di lavoro, in modo che il piano di lavoro sia sempre tenuto sotto il controllo del flusso di aria sterile.Inoltre, sul lato vicino all'esterno è presente una barriera d'aria ad alta velocità per impedire l'ingresso di aria batterica esterna.
In luoghi con condizioni difficili, è possibile utilizzare anche scatole sterili in legno al posto del banco pulito.La scatola sterile ha una struttura semplice ed è facile da spostare.Sulla parte anteriore della scatola sono presenti due fori che vengono bloccati da porte push-pull quando non sono in funzione.È possibile estendere le braccia durante il funzionamento.La parte superiore del frontale è dotata di vetro per facilitare la manovrabilità interna.All'interno della scatola è presente una lampada a raggi ultravioletti e gli utensili e i batteri possono essere inseriti attraverso una piccola porta sul lato.
Le tecniche operative asettiche attualmente non solo svolgono un ruolo fondamentale nella ricerca e nelle applicazioni microbiologiche, ma sono anche ampiamente utilizzate in molte biotecnologie.Ad esempio, la tecnologia transgenica, la tecnologia degli anticorpi monoclonali, ecc.
Orario di pubblicazione: 06-marzo-2024