Esistono due principali fonti di contaminazione nelle camere bianche: particelle e microrganismi, che possono essere causati da fattori umani e ambientali o da attività correlate nel processo. Nonostante i migliori sforzi, la contaminazione continuerà a penetrare nella camera bianca. I portatori specifici di contaminazione comune includono corpi umani (cellule, capelli), fattori ambientali come polvere, fumo, nebbia o attrezzature (attrezzature di laboratorio, attrezzature per la pulizia) e tecniche di pulizia e metodi di pulizia inadeguati.
Il vettore di contaminazione più comune sono le persone. Anche con gli indumenti più rigorosi e le procedure operative più rigorose, gli operatori non adeguatamente addestrati rappresentano la più grande minaccia di contaminazione nelle camere bianche. I dipendenti che non seguono le linee guida per le camere bianche rappresentano un fattore ad alto rischio. Se un dipendente commette un errore o dimentica un passaggio, ciò porterà alla contaminazione dell’intera camera bianca. L'azienda può garantire la pulizia della camera bianca solo attraverso il monitoraggio continuo e l'aggiornamento continuo della formazione con tasso di contaminazione pari a zero.
Altre importanti fonti di contaminazione sono gli strumenti e le attrezzature. Se un carrello o una macchina vengono puliti solo approssimativamente prima di entrare nella camera bianca, potrebbero introdurre microrganismi. Spesso i lavoratori non sono consapevoli del fatto che le attrezzature su ruote rotolano su superfici contaminate mentre vengono spinte nella camera bianca. Le superfici (compresi pavimenti, pareti, attrezzature, ecc.) vengono regolarmente testate per i conteggi vitali utilizzando piastre di contatto appositamente progettate contenenti terreni di crescita come Trypticase Soy Agar (TSA) e Sabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA è un terreno di crescita progettato per batteri e SDA è un terreno di crescita progettato per muffe e lieviti. TSA e SDA vengono generalmente incubati a temperature diverse, con TSA esposto a temperature comprese tra 30 e 35°C, che è la temperatura di crescita ottimale per la maggior parte dei batteri. L'intervallo 20-25˚C è ottimale per la maggior parte delle specie di muffe e lieviti.
Un tempo il flusso d'aria era una causa comune di contaminazione, ma gli odierni sistemi HVAC per camere bianche hanno praticamente eliminato la contaminazione dell'aria. L'aria nella camera bianca viene controllata e monitorata regolarmente (ad esempio, giornalmente, settimanalmente, trimestralmente) per quanto riguarda il conteggio delle particelle, i conteggi vitali, la temperatura e l'umidità. I filtri HEPA vengono utilizzati per controllare il numero di particelle nell'aria e hanno la capacità di filtrare le particelle fino a 0,2 µm. Questi filtri vengono solitamente mantenuti in funzione continuamente a una portata calibrata per mantenere la qualità dell'aria nella stanza. L'umidità viene solitamente mantenuta a un livello basso per impedire la proliferazione di microrganismi come batteri e muffe che preferiscono ambienti umidi.
Infatti, la fonte di contaminazione più comune e di livello più elevato nelle camere bianche è l'operatore.
Le fonti e le vie di ingresso della contaminazione non variano in modo significativo da settore a settore, ma esistono differenze tra i settori in termini di livelli di contaminazione tollerabili e intollerabili. Ad esempio, i produttori di compresse ingeribili non sono tenuti a mantenere lo stesso livello di pulizia dei produttori di agenti iniettabili che vengono introdotti direttamente nel corpo umano.
I produttori farmaceutici hanno una tolleranza inferiore alla contaminazione microbica rispetto ai produttori di dispositivi elettronici ad alta tecnologia. I produttori di semiconduttori che realizzano prodotti microscopici non possono accettare alcuna contaminazione da particelle per garantire la funzionalità del prodotto. Pertanto, queste aziende si preoccupano solo della sterilità del prodotto da impiantare nel corpo umano e della funzionalità del chip o del telefono cellulare. Sono relativamente meno preoccupati per muffe, funghi o altre forme di contaminazione microbica nelle camere bianche. D’altro canto, le aziende farmaceutiche sono preoccupate per tutte le fonti di contaminazione, vive e morte.
L'industria farmaceutica è regolamentata dalla FDA e deve seguire rigorosamente le norme GMP (Buone pratiche di fabbricazione) poiché le conseguenze della contaminazione nell'industria farmaceutica sono molto dannose. Non solo i produttori di farmaci devono garantire che i loro prodotti siano privi di batteri, ma sono anche tenuti a disporre di documentazione e tracciabilità di tutto. Un'azienda di apparecchiature ad alta tecnologia può spedire un laptop o una TV purché superi l'audit interno. Ma non è così semplice per l’industria farmaceutica, motivo per cui è fondamentale per un’azienda disporre, utilizzare e documentare le procedure operative delle camere bianche. A causa di considerazioni sui costi, molte aziende assumono servizi di pulizia professionali esterni per eseguire servizi di pulizia.
Un programma completo di test ambientali per camere bianche dovrebbe includere particelle sospese nell'aria visibili e invisibili. Sebbene non vi sia alcun requisito che tutti i contaminanti in questi ambienti controllati siano identificati da microrganismi. Il programma di controllo ambientale dovrebbe includere un livello adeguato di identificazione batterica delle estrazioni dei campioni. Esistono molti metodi di identificazione batterica attualmente disponibili.
Il primo passo nell’identificazione dei batteri, soprattutto quando si tratta di isolamento in camera bianca, è il metodo della colorazione di Gram, in quanto può fornire indizi interpretativi sulla fonte della contaminazione microbica. Se l'isolamento e l'identificazione microbica mostrano cocchi Gram-positivi, la contaminazione potrebbe provenire dall'uomo. Se l'isolamento e l'identificazione microbica mostrano bastoncini Gram-positivi, la contaminazione potrebbe provenire da polvere o ceppi resistenti ai disinfettanti. Se l'isolamento e l'identificazione microbica mostrano bastoncini Gram-negativi, la fonte della contaminazione potrebbe provenire dall'acqua o da qualsiasi superficie bagnata.
L'identificazione microbica nelle camere bianche farmaceutiche è estremamente necessaria perché è correlata a molti aspetti della garanzia della qualità, come i test biologici negli ambienti di produzione; test di identificazione batterica dei prodotti finali; organismi senza nome in prodotti sterili e acqua; controllo di qualità della tecnologia di stoccaggio della fermentazione nel settore biotecnologico; e verifica dei test microbici durante la validazione. Il metodo della FDA per confermare che i batteri possono sopravvivere in un ambiente specifico diventerà sempre più comune. Quando i livelli di contaminazione microbica superano il livello specificato o i risultati dei test di sterilità indicano contaminazione, è necessario verificare l'efficacia degli agenti detergenti e disinfettanti ed eliminare l'identificazione delle fonti di contaminazione.
Esistono due metodi per monitorare le superfici ambientali delle camere bianche:
1. Piastre di contatto
Queste speciali piastre di coltura contengono un terreno di crescita sterile, preparato in modo che sia più alto del bordo della piastra. Il coperchio della piastra di contatto copre la superficie da campionare e tutti i microrganismi visibili sulla superficie aderiranno alla superficie dell'agar e incuberanno. Questa tecnica può mostrare il numero di microrganismi visibili su una superficie.
2. Metodo con tampone
Questo è sterile e conservato in un liquido sterile adatto. Il tampone viene applicato sulla superficie del test e il microrganismo viene identificato recuperando il tampone nel terreno. I tamponi vengono spesso utilizzati su superfici irregolari o in aree difficili da campionare con una piastra a contatto. Il campionamento con tampone è più un test qualitativo.
Orario di pubblicazione: 21 ottobre 2024