Esistono due principali fonti di contaminazione nelle camere bianche: particelle e microrganismi, che possono essere causati da fattori umani e ambientali, o da attività correlate al processo. Nonostante i migliori sforzi, la contaminazione penetra comunque nelle camere bianche. Tra i vettori di contaminazione più comuni figurano corpi umani (cellule, capelli), fattori ambientali come polvere, fumo, nebbia o attrezzature (attrezzature di laboratorio, attrezzature per la pulizia) e tecniche e metodi di pulizia impropri.
Il vettore di contaminazione più comune sono le persone. Anche con gli indumenti e le procedure operative più rigorosi, gli operatori non adeguatamente formati rappresentano la principale minaccia di contaminazione in una camera bianca. I dipendenti che non seguono le linee guida per la camera bianca rappresentano un fattore di rischio elevato. Basta un solo dipendente per commettere un errore o dimenticare un passaggio, per contaminare l'intera camera bianca. L'azienda può garantire la pulizia della camera bianca solo attraverso un monitoraggio continuo e un aggiornamento continuo della formazione, con un tasso di contaminazione pari a zero.
Altre importanti fonti di contaminazione sono gli utensili e le attrezzature. Se un carrello o una macchina vengono puliti solo approssimativamente prima di entrare nella camera bianca, potrebbero introdurre microrganismi. Spesso, gli operatori non si rendono conto che le attrezzature su ruote rotolano sulle superfici contaminate mentre vengono spinte nella camera bianca. Le superfici (inclusi pavimenti, pareti, attrezzature, ecc.) vengono regolarmente testate per la conta vitale utilizzando piastre a contatto appositamente progettate contenenti terreni di coltura come Trypticase Soy Agar (TSA) e Sabouraud Dextrose Agar (SDA). Il TSA è un terreno di coltura progettato per i batteri, mentre l'SDA è un terreno di coltura progettato per muffe e lieviti. Il TSA e l'SDA vengono in genere incubati a temperature diverse, con il TSA esposto a temperature comprese tra 30 e 35 °C, che è la temperatura di crescita ottimale per la maggior parte dei batteri. L'intervallo tra 20 e 25 °C è ottimale per la maggior parte delle specie di muffe e lieviti.
Un tempo il flusso d'aria era una causa comune di contaminazione, ma oggi i sistemi HVAC per camere bianche hanno praticamente eliminato la contaminazione dell'aria. L'aria nelle camere bianche viene controllata e monitorata regolarmente (ad esempio, quotidianamente, settimanalmente, trimestralmente) per il conteggio delle particelle, il conteggio delle particelle vitali, la temperatura e l'umidità. I filtri HEPA vengono utilizzati per controllare il conteggio delle particelle nell'aria e sono in grado di filtrare particelle fino a 0,2 µm. Questi filtri vengono solitamente tenuti in funzione ininterrottamente a una portata calibrata per mantenere la qualità dell'aria nella stanza. L'umidità viene solitamente mantenuta a un livello basso per prevenire la proliferazione di microrganismi come batteri e muffe che prediligono gli ambienti umidi.
Infatti, il livello più alto e la fonte più comune di contaminazione nelle camere bianche è l'operatore.
Le fonti e le vie di ingresso della contaminazione non variano significativamente da un settore all'altro, ma esistono differenze tra i diversi settori in termini di livelli di contaminazione tollerabili e intollerabili. Ad esempio, i produttori di compresse ingeribili non sono tenuti a mantenere lo stesso livello di pulizia dei produttori di agenti iniettabili che vengono introdotti direttamente nel corpo umano.
Le aziende farmaceutiche hanno una tolleranza alla contaminazione microbica inferiore rispetto alle aziende di elettronica high-tech. I produttori di semiconduttori che realizzano prodotti microscopici non possono accettare alcuna contaminazione particellare per garantire la funzionalità del prodotto. Pertanto, queste aziende si preoccupano solo della sterilità del prodotto da impiantare nel corpo umano e della funzionalità del chip o del telefono cellulare. Sono relativamente meno preoccupate da muffe, funghi o altre forme di contaminazione microbica nelle camere bianche. D'altra parte, le aziende farmaceutiche sono preoccupate per tutte le fonti di contaminazione, vive e morte.
L'industria farmaceutica è regolamentata dalla FDA e deve seguire rigorosamente le norme di Buona Fabbricazione (GMP), poiché le conseguenze della contaminazione in questo settore sono molto dannose. I produttori di farmaci non solo devono garantire che i loro prodotti siano privi di batteri, ma sono anche tenuti a documentare e tracciare ogni aspetto. Un'azienda produttrice di apparecchiature high-tech può spedire un laptop o un televisore, a condizione che superi l'audit interno. Ma per l'industria farmaceutica non è così semplice, motivo per cui è fondamentale che un'azienda disponga, utilizzi e documenti le procedure operative per le camere bianche. Per questioni di costi, molte aziende si avvalgono di servizi di pulizia professionali esterni.
Un programma completo di analisi ambientali per camere bianche dovrebbe includere particelle sospese nell'aria visibili e invisibili. Sebbene non vi sia alcun requisito che tutti i contaminanti in questi ambienti controllati siano identificati dai microrganismi, il programma di controllo ambientale dovrebbe includere un livello adeguato di identificazione batterica dei campioni estratti. Attualmente sono disponibili numerosi metodi di identificazione batterica.
Il primo passo nell'identificazione batterica, soprattutto quando si tratta di isolamento in camera bianca, è il metodo della colorazione di Gram, poiché può fornire indizi interpretativi sulla fonte della contaminazione microbica. Se l'isolamento e l'identificazione microbica mostrano cocchi Gram-positivi, la contaminazione potrebbe essere di origine umana. Se l'isolamento e l'identificazione microbica mostrano bastoncini Gram-positivi, la contaminazione potrebbe essere derivata da ceppi resistenti alla polvere o ai disinfettanti. Se l'isolamento e l'identificazione microbica mostrano bastoncini Gram-negativi, la fonte della contaminazione potrebbe essere derivata dall'acqua o da qualsiasi superficie bagnata.
L'identificazione microbica nelle camere bianche farmaceutiche è fondamentale perché è correlata a molti aspetti della garanzia della qualità, come i biotest negli ambienti di produzione; i test di identificazione batterica dei prodotti finali; la presenza di organismi non identificati in prodotti sterili e acqua; il controllo di qualità delle tecnologie di conservazione e fermentazione nel settore biotecnologico; e la verifica dei test microbici durante la convalida. Il metodo della FDA per confermare la sopravvivenza dei batteri in un ambiente specifico diventerà sempre più comune. Quando i livelli di contaminazione microbica superano il livello specificato o i risultati dei test di sterilità indicano contaminazione, è necessario verificare l'efficacia degli agenti di pulizia e disinfezione ed eliminare l'identificazione delle fonti di contaminazione.
Esistono due metodi per monitorare le superfici ambientali delle camere bianche:
1. Piastre di contatto
Queste speciali piastre di coltura contengono un terreno di coltura sterile, preparato in modo da superare il bordo della piastra stessa. Il coperchio della piastra a contatto copre la superficie da campionare e tutti i microrganismi visibili sulla superficie aderiranno alla superficie dell'agar e verranno incubati. Questa tecnica può mostrare il numero di microrganismi visibili su una superficie.
2. Metodo del tampone
Il tampone è sterile e conservato in un liquido sterile idoneo. Il tampone viene applicato sulla superficie da testare e il microrganismo viene identificato immergendo il tampone nel terreno. I tamponi vengono spesso utilizzati su superfici irregolari o in aree difficili da campionare con una piastra a contatto. Il campionamento tramite tampone è più un test qualitativo.
Data di pubblicazione: 21-10-2024